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兔蛋白激酶N1(PKN1)ELISA试剂盒
双夹心:本法主要用于检测大分子抗原。现以检测鸡传染性法氏囊病(IBDV)的双夹心ELISA为例介绍本法的操作程序。① 加包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干② 加待检抗原 → 37℃ 30分钟,洗涤三次、抛干③ 加酶标 → 37℃ 30分钟,洗涤三次、抛干④ 加底物液 → 37℃ 15分钟,加终止液⑤ 用ELISA检测仪测定OD值。
ELISA:本法主要用于检测型特。该现已成为猪传染性胃肠炎(TGE)、猪伪(PR)及猪胸膜肺炎(AP)的主要检测。下面以AP2型的ELISA检测法为例介绍其操作程序:① 100μl AP2型工作量抗原包被 → 4℃过夜,洗涤三次、抛干② 用200μl缓冲液进行封闭 → 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干③ 加工作量1:4稀释被检猪100μl → 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干④ 加100μl工作量兔抗AP2型 → 37℃ 30分钟,洗涤三次、抛干⑤ 加100μl工作量猪抗兔IgG-HRP → 37℃ 60分钟,洗涤三次、抛干⑥ 加100μl OPD底物液 → 37℃ 20分钟,加终止液⑦ 用ELISA检测仪测定OD值。本试验同时设阴、阳性对照、兔抗AP2型阳性对照、空白对照。
自备材料
1)蒸馏水。
2)加样器:5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。
3)振荡器及磁力搅拌器等。
兔蛋白激酶N1(PKN1)ELISA试剂盒
样品收集、处理及保存
1)-----操作中避免任何细胞。使用不含热原和内的试管。收集血液后,1000×g离心10分钟将和红细胞迅速小心地分离。
2)-----EDTA、柠檬酸盐、肝素可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。
3)细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4)组织匀浆-----将组织加入适量盐水捣碎。1000×g离心10分钟,取上清液
5)保存------如果样品不立即使用,应将其分成小部分-70 ℃保存,避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果中大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
试剂盒性能
1. 灵敏度的检测浓度小于1号品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。
2. 特:不与其它细胞因子反应。
3. 重复性:板内、板间变异系数均小于10%。
结果判断与分析
1、仪器值:于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值
2、以吸光度OD值为纵坐标(Y),相应的待测品浓度为横坐标(X),做得相应的曲线,样品的待测含量可根据其OD值由曲线换算出相应的浓度。
免责声明
试剂盒仅供研究使用,不得用于临床实验或生物体实验,否则所产生的一切后果,由实验者承担, 本公司概不负责。
严格按照说明书操作,不同批号不可交换使用,实验者违反说明书操作,后果由实验者承担。
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